Kardinal Scipione Borghese (1577-1633), en lærd og ivrig kunstsamler i sin samtid, grunnla museets samling. Opprinnelig befant den seg i kardinalens residens i nærheten av Peterskirken, men i 1620-årene ble den flyttet til hans nye villa på Pincian Hill. Galleria Borghese har en kunstsamling som består av over 800 Malerier, nærmere hundre Skulpturer og en rekke andre kunstprodukter. Besøkende kan forvente å se verk av kjente kunstnere som Caravaggio, Raphael og Titian, i tillegg til gammel romersk kunst.