Kardinaal Scipione Borghese (1577-1633), een erudiet en fervent kunstverzamelaar van zijn tijd, stichtte de collectie van het museum. Het was oorspronkelijk ondergebracht in het herenhuis van de kardinaal vlakbij de Sint Pieter, maar het werd in de jaren 1620 verplaatst naar zijn nieuwe villa buiten op de Pincian Hill. De collectie kunstwerken van Galleria Borghese bestaat uit meer dan 800 schilderijen, bijna honderd beeldhouwwerken en verschillende andere kunstvoorwerpen. Bezoekers kunnen werken verwachten van beroemde kunstenaars als Caravaggio, Rafaël en Titiaan, maar ook oude Romeinse kunst.