Le cardinal Scipione Borghese (1577-1633), érudit et grand collectionneur d'art de son temps, a fondé la collection du musée. Il se trouvait à l'origine dans la demeure du cardinal, près de Saint-Pierre, mais il a été transféré dans sa nouvelle villa à l'extérieur, sur la colline du Pincian, dans les années 1620. La collection d'œuvres d'art de la Galerie Borghèse comprend plus de 800 peintures, près d'une centaine de sculptures et divers autres objets d'art. Les visiteurs peuvent s'attendre à voir des œuvres d'artistes célèbres tels que Caravaggio, Raphaël et Titien, ainsi que de l'art romain ancien.